ELISA實驗通用規(guī)則
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但最好有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
3、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
4、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
5、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
6、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、實驗時，要使底物避光保存。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
11、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
ELISA試劑盒實驗中需留心下列的細(xì)節(jié)：
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時刻和溫度進行溫育以保證成果。一切試劑都必須在運用前到達室溫20-25℃。運用后當(dāng)即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確能夠?qū)е虏坏某晒?。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔枯燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的色彩，現(xiàn)已變藍的底物液不能運用。
5. 防止試劑和標(biāo)本的穿插污染以免形成錯誤成果。
6. 在儲存和溫育時防止強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反響試劑不能觸摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會損壞試劑盒中反響試劑的生物活性。
9. 不能運用過期產(chǎn)品。
10. 假如可能傳播疾病，一切的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測設(shè)備。
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